Методика реакции РПГА (по Бойдену)

Содержание

Анализ крови РПГА: что это? расшифровка при сифилисе

Методика реакции РПГА (по Бойдену)

Анализ крови РПГА относится к классическим способам диагностики, которые применяются уже многие десятки лет, но по-прежнему актуальны. Для чего в настоящее время проводится РПГА? Почему его иногда предпочитают современным методикам, и когда может столкнуться обычный человек с необходимостью такого исследования?

Наиболее современным методом современной лабораторной диагностики инфекционных заболеваний является полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет определить в любом биологическом материале, от крови и до соскоба со слизистых оболочек остатки генома, или уникального наследственного кода возбудителя болезни. Вторым методом диагностики является определение иммуноглобулинов класса М и G в крови пациента, которые свидетельствуют о развитии специфического иммунного ответа.

Что такое РПГА в анализе крови?

Этот способ исследования (реакция пассивной гемагглютинации, РПГА) имеет и второе название: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). И в практике может встретиться как аббревиатура РПГА, так и РНГА.

Что это за анализ? Для него необходима центрифугированная сыворотка крови пациента, которую совмещают с особым диагностическим реагентом. Классически он называется «эритроцитарный антигенный диагностикум». Для его приготовления долгие годы использовались клетки красной крови, или эритроциты.

Но так было сравнительно давно, а в настоящее время биологический материал уже не используют, и вместо этого применяют микроскопические частицы латекса.

На эти частицы с помощью особой технологии наносят характерные для данного инфекционного возбудителя антигены, которые являются его «визитной карточкой». В результате получается множество частиц, на поверхности которых находятся адсорбированные, и крепко связанные с носителем активные молекулы антигена.

В том случае, если в сыворотке крови пациента находятся выработанные к данному возбудителю антитела, то эти частицы латекса или эритроциты, склеиваются антителами между собой, и выпадают в осадок, который называется агглютинацией (переводе означает «склеивание»).

Эту реакцию ставят в специальных планшетах, которые выполнены из пластика и рассчитаны на небольшие объемы. А раньше анализ крови на РПГА проводилась с набором обычных пробирок. В них в разных разведениях находилась кровь пациента, к которой и добавляли диагностикум.

В некоторых случаях применяется зеркальный метод, когда диагностикум содержит не антигены, а антитела. Этот метод (РОНГА, или обратная гемагглютинация) применяется при поиске инфекции, при которых в крови циркулируют токсины, например при ботулизме.

В таком случае, если у пациента в крови есть ботулотоксин, то он связывается со специфическими антитоксическими антителами диагностикумов, и также наблюдается реакция агглютинации, которую можно определить в зависимости от разведения сыворотки крови.

Расшифровка складывается из самого факта агглютинации, и того максимального разведения сыворотки крови, при которой она еще уверенно определяется.

Чем больше разведена кровь, при которой еще есть агглютинация, тем больше в организме пациента находится антител, и тем выше специфическая напряженность иммунитета при классическом проведении этой реакции.

Наиболее часто используется разведения от 1:20 до 1:160 и выше. В настоящее время непрямую РНГА чаще всего используют для первичной диагностики сифилиса.

Рпга при сифилисе

Анализ крови РПГА — что это при сифилисе? Это проведение реакции в ее классическом виде, при которой у пациента в сыворотки его крови выявляются циркулирующие антитела к возбудителю сифилиса.

Этот способ является недорогим, быстрым, и позволяет первично использовать исследовать биологический материал для скрининга этой инфекции, для обследования доноров, сдающих кровь, для контактных лиц, близко общавшихся с больными.

Таким образом, Рпга при сифилисе является методом первичной неспецифической лабораторной диагностики. Но это вовсе не значит, что если такие антитела выявлены, то это анализ может считаться недостоверным.

Выявление антител к бледной спирохете является основой лабораторной диагностики сифилиса и его подтверждения.

И реакция пассивной гемагглютинации относятся к специфическим или трепонемный тестам, поскольку в нем используются «настоящие», сифилитические антигены.

После того, как к специфическому диагностикуму добавляется сыворотка крови, больного сифилисом, то происходит гемагглютинация. Эти циркулирующие в крови антитела могут появиться уже через 2 недели после заражения.

В этом случае речь идет об антителах «быстрого реагирования», или об иммуноглобулинах класса М. Через месяц они дополняются специфическими иммуноглобулинами класса G.

Поэтому при начале заболевания эта реакция определяет только один вид антител, говорящих об острой инфекции, а во вторичном и третичном периоде сифилиса она «улавливает» антитела класса G, которых в крови накапливается довольно много.

Именно поэтому чувствительность этой реакции при дебюте заболевания несколько ниже, а если человек болен сифилисом несколько лет, то ее чувствительность приближается к 100% против 86% в случае первичного, свежего и недавнего сифилиса.

Эта реакция является высокоспецифичной и с ее помощью можно подтвердить или опровергнуть первичный диагноз, который был поставлен с помощью применения нетрепонемного теста. К таким нетрепонемным тестам относится RW или всем известная реакция Вассермана.

При ее постановке в качестве антигена берется кардиолипиновый антиген, который не имеет никакого отношения к возбудителю.

Он очень похож по своей структуре на сифилитический, но, все-таки, несколько отличается от него, и поэтому при этом виде исследования возможны ложноположительные реакции.

Рпга как метод переподтверждения

Поэтому в том случае, если у пациента при реакции Вассермана выявлено положительное ее значение, то для подтверждения или опровержения результатов RW необходимо выполнить реакцию пассивной гемагглютинации. Специфичность РПГА составляет от 96 до 100%. Даже при скрытом сифилисе без всяких проявлений она может также поставить диагноз с практически 100% вероятностью.

Поскольку правила диагностики сифилиса обязательно требуют переподтверждения первичного диагноза другим методом, то в том случае, если первичным методом диагностики является сама РПГА, то ее тоже необходимо переподтвердить, несмотря на ее высокую чувствительность, но уже только с помощью другого метода. И тогда используется тоже трепонемный тест, но только другой, например, нужно расшифровывать новые значения методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Значение при самых ранних сроках и при выздоровлении

Поскольку антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов G, сохраняются в сыворотке крови, как правило, пожизненно, то даже после активного и успешного лечения сифилиса с последующим выздоровлением эти антитела остаются положительными. Только в том случае, когда сифилис заподозрили и пролечили в «самом зародыше», через несколько дней после заражения, на стадии формирования твердого шанкра и регионарного лимфаденита, то тогда РПГА может быть отрицательной.

Тот факт, что и при вторичном сифилисе, и при третичном РПГА будет одинаково положительной, то это значит, что такое исследование нельзя использовать для дифференциальной диагностики стадий заболевания.

С помощью РПГА также невозможно оценить эффективность лечения, поскольку при этом антитела всё равно будут циркулировать в крови. Эффективность терапии необходимо оценивать с помощью других лабораторных анализов.

Особенно высокие показатели, то и значительное разведение сыворотки крови пациента при проведении РПГА возникают при вторичном сифилисе, а также при ранней и скрытой форме этой болезни.

О ложноположительных значениях

Но, несмотря на высокую чувствительность и специфичность этого теста, также при проведении РПГА на сифилис возможны ложноположительные значения.

Они возникают нечасто, не более чем в 2,6% случаев, и появляются при циркуляции в крови пациента антител, очень похожих на сифилитические, но не являющиеся ими.

Это могут быть аутоантитела, и чаще всего такие «сюрпризы» подбрасывает системная красная волчанка.

Также те заболевания, которые вызываются другими представителями трепонем, или спирохет, могут приводить к ложноположительным значениям, например, болезнь Лайма, которую вызывает «близкая родственница» сифилиса Borrelia burgdorferi. О диагностике болезни Лайма, или клещевого боррелиоза, можно прочитать здесь.

В некоторых случаях, к таким искажениям приводит онкологическая патология, состояние беременности, и даже вялотекущий острый инфаркт миокарда.

В последнем случае в кровь попадают частицы некротизированной сердечной мышцы, которые по своей структуре аналогичны кардиолипиновому антигену, он применяется для постановки реакции Вассермана, и извлекается из сердца крупного рогатого скота.

Также причиной ложноположительных результатов могут быть случаи внутривенной наркомании, ВИЧ-инфекция и вирусные гепатиты B и C, лептоспирозы и возвратный тиф, а также заболевания, которые встречаются в жарких странах и вызываются трепонемами — пинта, фрамбезия, беджель.

В редких случаях, у пациентов с низким иммунитетом могут активизироваться трепонемы, которые относятся к сапрофитам и обитают в полости рта.

Также туберкулез и инфекционный мононуклеоз могут быть причиной таких реакций, как и в случае обширной политравмы и многочисленных переломов.

Такие ложноположительные реакции необходимо перепроверять через некоторое время, обычно они исчезают в течение полугода, например, после разрешения беременности или в течение более длительного времени.

Подготовка и показания к РПГА

Подготовки к анализу никакой не требуются, единственное исключение сделано для курящих. Последняя сигарета должна быть выкуренной не раньше, через 30 минут до сдачи крови, а лучше вообще отказаться от курения в этот день. Забирается венозная кровь из локтевой вены, и показано проведение этого исследования четырем группам пациентов:

  • лицам, у которых есть симптомы и признаки сифилиса (к ним относятся вероятный шанкр, увеличение регионарных паховых лимфоузлов, непонятная кожная сыпь на фоне подозрительного анамнеза, вялотекущий менингит, диффузное облысение, симптомы сифилитической лейкодермы во втором периоде, либо подозрение на образование гумм, признаки спинной сухотки, звездчатые рубцы, говорящие о запущенном третичном сифилисе;
  • лица, находящиеся в половом и бытовом контакте с больными;
  • доноры;
  • оформление санитарной книжки, профилактические медицинские осмотры, плановая госпитализация в лечебное учреждение.

Пятой категорией лиц являются те пациенты, у которых была выявлена положительная реакция на сифилис, полученная другими методами диагностики, чаще всего реакцией Вассермана.

Интерпретация результатов РПГА на сифилис

В норме РПГА должно быть отрицательной, то есть гемагглютинации у пациента не должно возникать ни при каких условиях. В случае положительных результатов — это самая различная форма сифилиса, в том числе врождённый.

Все остальные реакции относятся к ложноположительным, и о них уже говорилось выше.

Лишь в редких случаях отрицательная реакция РПГА на сифилис может говорить о слишком рано взятом анализе при наличии инфекции, когда ещё не наработались антитела, то есть вплоть до 6 недели после заражения.

Источник: https://MyAnaliz.ru/infektsii/syphilis/analiz-krovi-rpga-chto-eto/

Что такое анализ крови на РПГА

Методика реакции РПГА (по Бойдену)

Несмотря на то что РПГА анализ крови применяется уже более 10 лет, это тестирование до сих пор не утрачивает актуальности.

При помощи процедуры можно выявить разные патологические процессы, но чаще направление на анализ выдается при подозрении на сифилис и инфекционные заболевания органов желудочно-кишечного тракта.

При выдаче направления на исследование нужно разобраться в том, как сдавать кровь и насколько точным является тестирование.

Особенности анализа

Из 10 человек расшифровку анализа крови РПГА знают не более половины. Под этой аббревиатурой подразумевается реакция пассивной гемагглютинации. Методика применяется для выявления внутренних патологических процессов, но особенно она эффективна при подозрении на сифилис.

Это обусловлено тем, что тест точно определяет антитела бледной трепонемы – микроорганизма, провоцирующего развитие сифилиса. При попадании в здоровый организм этого возбудителя иммунная система начинает активно вырабатывать антитела против него. Если тестирование показало присутствие возбудителя, пациенту нужно незамедлительно сдать дополнительные анализы на сифилис.

Условно тестирование можно разделить на 2 типа:

  • специфическое;
  • неспецифическое.

Классификация варьируется от типа антител, которые были выявлены в сыворотке крови. Главное преимущество анализа крови на РПГА заключается в том, что при помощи него можно выявить заболевание, вне зависимости от того, на каком этапе оно находится.

Преимущества РПГА

Тест РПГА проводят во всем мире не только из-за высокой точности и достоверности, но и из-за следующих достоинств:

  • процедура отличается простотой. Все, что необходимо сделать пациенту, – сдать кровь;
  • отсутствие необходимости использования специального дорогостоящего оборудования;
  • быстрая расшифровка. Обычно результат оглашается уже через сутки после сдачи биоматериала.

Показания к тестированию

В целях профилактики медики рекомендуют сдавать кровь на РПГА каждый год. Абсолютными показаниями к проведению такого тестирования являются:

  • проявление симптомов сифилиса. Основные признаки этого заболевания – возникновение эрозий и язв на кожном покрове (в особенности в области половых органов), увеличение лимфоузлов, частичное поредение волосяного покрова;
  • появление симптомов алопеции разных видов (патологическое облысение);
  • незащищенный половой контакт с предполагаемым носителем болезни.

Также тестирование в обязательном порядке назначается людям, которые хотят сдавать кровь как доноры. Кроме вышеперечисленных ситуаций, подобный анализ назначается при оформлении медкнижки и при определении человека в стационар. Также медик может выписать направление на РПГА анализ при подозрении на дифтерию, дизентерию или сальмонеллу.

Что показывает анализ

В большинстве случаев положительный результат РПГА указывает на сифилис врожденной или приобретенной формы. Также при помощи тестирования можно обнаружить следующие патологии:

  • вирус иммунодефицита человека;
  • гепатит;
  • возвратный брюшной тиф;
  • туберкулез легких;
  • дифтерия;
  • коклюш;
  • воспалительные поражения слизистых оболочек ротовой полости и гениталий;
  • формирование новообразований злокачественного происхождения;
  • мононуклеоз инфекционной природы;
  • диффузные поражения соединительных тканей;
  • венерические заболевания.

Чтобы тестирование показало достоверный результат, сдавать биоматериал нужно, соблюдая все врачебные рекомендации. В противном случае возбудитель может быть не обнаружен.

Многих интересует вопрос, почему при подозрении на сифилис назначается именно анализ РПГА. Популярность такого тестирования в диагностике этой опасной болезни обусловлена его достоверностью. Медики уверяют, что анализ показывает правильный результат в 99% случаев.

Анализ крови на микрореакцию

При отсутствии антител бледной трепонемы реакция агглютинации не произойдет, что говорит о том, что человек здоров.

Стоит учитывать, что чувствительность такого теста очень высока, поэтому обнаружить возбудитель сифилиса удастся даже на скрытых стадиях заболевания.

Сдачу образца на такое тестирование назначают и при подозрении на другие болезни, например, коклюш или иерсиниоз. Востребованность анализа обусловлена тем, что по сравнению с другими серологическими тестированиями он более чувствителен, что увеличивает вероятность получения достоверного результата.

Как проводится процедура

Для осуществления анализа подходит только венозная кровь. Чтобы тестирование показало точный результат, пациенту требуется подготовиться к нему и придерживаться следующих рекомендаций:

  • кровь сдают исключительно на голодный желудок, поэтому есть можно не позднее, чем за 10 часов до процедуры. Единственное, что допускается – выпить утром стакан воды;
  • за 3 часа до забора крови нельзя курить;
  • если пациенту назначен прием лекарственных средств на постоянной основе, об этом нужно оповестить врача, который будет проводить расшифровку анализа.

В большинстве случаев расшифровка результата занимает не более суток, но иногда длится до 4 дней. Срок может незначительно меняться в зависимости от лаборатории и типа используемого оборудования.

Расшифровка результата

Анализ проводится путем добавления к образцу специального реактива. При наличии в крови бледной трепонемы происходит реакция агглютинации, и эритроциты выпадают в осадок. По числу склеенных эритроцитов можно делать выводы о том, сколько антител присутствует в образце.

Результаты тестирования оцениваются по 4-балльной системе, по размеру сформировавшейся пленки. При появлении реакции агглютинации эритроциты остаются на поверхности лунки, образуя собой «зонтик». При отрицательном результате они опускаются вниз и скапливаются на дне в центре лунки.

Результат тестирования расшифровывается таким образом:

  • «-» – отрицательный результат. При нем красные кровяные тельца опускаются на дно, образуя компактный осадок;
  • «1+» – неоднозначная реакция. Эритроциты формируют неплотный осадок с нечеткими краями и просветом в середине;
  • «2+» – слабоположительная реакция. Внизу лунки появляется пленочка, образуя плотное кольцо с выраженным просветлением в центре;
  • «3+» – положительная реакция. Красные кровяные тельца почти целиком застилают лунку, при этом вокруг осадка образуется четкое кольцо;
  • «4+» – положительная реакция. При РПГА 4+ эритроциты формируют зонтик и равномерно застилают лунку.

Вот как могут выглядеть результаты теста РПГА

Положительный результат

Если тестирование дало положительную ответную реакцию, это говорит о присутствии в организме возбудителя болезни. В этом случае пациенту назначают дополнительные лабораторные и инструментальные анализы, отталкиваясь от которых можно будет подтвердить или опровергнуть наличие заболевания.

При положительном результате сдать анализ РПГА необходимо провести человеку, с которым инфицированный вступал в половой контакт. Стоит учитывать, что примерно в 5% случаев анализ РПГА дает ложноположительный результат. Чаще всего это связано с игнорированием правил подготовки.

Также ложноположительная реакция может проявиться в следующих случаях:

  • формирование онкологических новообразований;
  • гепатит разных форм;
  • ВИЧ.

В редких случаях ложноположительная реакция является признаком беременности. Отличительная особенность ложноположительного ответа – он сопровождается низким титром. Также стоит учитывать, что анализ может быть положительным, если пациент уже был болен сифилисом, но прошел успешное лечение.

Отрицательный результат

Отрицательная реакция РПГА говорит о том, что:

  • возбудитель сифилиса отсутствует в организме;
  • с момента инфицирования прошло менее 3-х недель. На столь раннем этапе иммунная система не начинает выработку антител;
  • неправильное проведение забора крови.

Если врач подозревал сифилис у пациента, но тестирование показало отрицательный результат. Через некоторое время рекомендуется сдать анализ повторно, чтобы убедиться в отсутствии патогенных микроорганизмов в сыворотке крови.

Насколько достоверен анализ

В ходе клинических исследований было выявлено, если забор крови осуществлялся должным образом и пациент соблюдал все правила по подготовке к процедуре, анализ не покажет ложный результат.

Если РПГА показало положительную реакцию, вероятность того, что человек является носителем сифилиса, составляет более 97%. Что касается ложноположительного ответа, то он может проявиться, если тестирование осуществлялось во время инфекционного заболевания или другого патологического состояния.

Заключение

Сегодня реакция пассивной агглютинации является преимущественной и по результативности превосходит все остальные тестирования.

Несмотря на то что методика чаще всего применяется для обнаружения антител бледной трепонемы, при помощи нее можно выявить и другие заболевания инфекционного происхождения.

Важно помнить, что результат тестирования зависит не только от методики проведения теста, но и от того, насколько правильно пациент подготовится к процедуре.

Источник: https://apkhleb.ru/krov/chto-takoe-analiz-rpga

Рпга анализ крови: что это за исследование, когда назначают, насколько точна расшифровка результатов, какие еще есть тесты на сифилис?

Методика реакции РПГА (по Бойдену)

Практически каждому из нас ежегодно приходится сдавать свою кровь для проведения различных исследований. Один из таких тестов – РПГА. Его требуют пройти при оформлении санитарной книжки, его назначает сдавать терапевт, кровь для этого анализа берут у беременных и даже детей. Что это за анализ такой, и что он показывает?

Что это за исследование?

РПГА — это аббревиатура словосочетания «реакция пассивной гемагглютинации». Что же это значит? Это значит, что при помощи определенных реагентов, в которые добавляют кровь, специалисты проверяют эритроциты на способность к склеиванию, а потом по типу реакции делают выводы о наличии или отсутствии болезней.

Этот анализ крови проводится для обнаружения в организме антител к возбудителям заболеваний, например, к бледной трепонеме, которая известна как возбудитель сифилиса.

Это означает, что при проведении такого исследования выявляют не сами бактерии Treponema pallidum, а только ту группу клеток, которую синтезирует организм для борьбы с болезнью.

В случае с сифилисом антитела могут обнаружиться в крови зараженного через четырнадцать и двадцать восемь дней после инфицирования, но иногда этот период увеличивается до сорока двух дней. Как это работает?

Когда в человеческий организм попадает чужеродная агрессивно настроенная бактерия, он определяет тип угрозы и начинает вырабатывать антитела для борьбы с возбудителем болезни.

Антитела разделяют на неспецифические и специфические или «нетрепонемные» и «трепонемные». Реакции, выявляющие тот или другой тип антител, называют аналогично.

РПГА относится к «трепонемным», или специфическим Treponema pallidum тестам.

Основное преимущество этого теста в его высокой специфичности, иначе говоря, узконаправленности на определенный тип антител.

Благодаря высокой чувствительности к «трепонемным» антителам, он позволяет удостовериться в правдивости положительного результата, другого, неспецифического теста. Такого, как антикардиолипиновый (RPR).

На сегодняшний день, для экспресс-теста на сифилис используют только специфические тесты, и РПГА в их числе.

При получении положительного результата проверки на сифилис нужно сдать подтверждающий анализ. Это делают при помощи другого специфического теста, например, иммуноферментного анализа.

Проверка крови на РПГА не занимает много времени. Обычно результаты бывают готовы через 2-3 дня с момента сбора крови. В случае острого недомогания, когда человек нуждается в оказании медицинской помощи, результаты теста выдают на месте в течение нескольких минут.

Предлагаем посмотреть видео о том, что такое анализ крови РПГА:

Показания к проведению

РПГА тест обычно назначают на профилактических осмотрах и перед госпитализацией. Также это один обязательных тестов для тех, кто хочет стать донором. В первую очередь, эта проверка необходима при планировании беременности, и в случае выявления клинических признаков сифилиса. К последним относятся:

  • симметричные высыпания по всему телу;
  • увеличение лимфоузлов;
  • безболезненные язвочки в области половых органов;
  • обильное выпадение волос.

Проверка крови методом РПГА показана людям, которые контактировали с инфицированными сифилисом и тем, кому требуется подтверждение результатов, полученных при другом исследовании.

Назначение на исследование может дать терапевт, дермато-венеролог или другой узкий специалист. Если у вас есть желание пройти это обследование, то вы можете обратиться в любую поликлинику.

Анализ крови методом РПГА, также могут назначить для поверки на:

  • корь;
  • дифтерию;
  • столбняк;
  • коклюш;
  • сальмонеллёз.

Обязательно нужен при оформлении некоторых документов, например, санитарной книжки, и для подготовки к хирургическому вмешательству.

Какие заболевания поможет выявить?

Проверка на РПГА – специфический тест, использующийся для диагностирования сифилиса. Проверка крови с использованием этого метода дает возможность обнаружить заражение организма на любой стадии. Как известно, все типы сифилиса, можно разделить на две стадии – раннюю и позднюю.

РПГА тест позволяет определить:

  • сифилис первичный серонегативный;
  • сифилис первичный серопозитивный;
  • вторичный свежий сифилис;
  • вторичный скрытый сифилис;
  • вторичный рецидивный сифилис;
  • третичный активный сифилис;
  • третичный скрытый сифилис;
  • скрытый сифилис;
  • сифилис плода;
  • ранний врождённый сифилис;
  • поздний врождённый сифилис;
  • скрытый врождённый сифилис;
  • висцеральный сифилис;
  • сифилис нервной системы.

Несмотря на то, что РПГА тест, в первую очередь, ассоциируется именно с проверкой на сифилис, он применяется и для диагностирования других внутренних болезней и прочих бактериологических патологий.

Для проведения диагностики других болезней, заменяется реагент в который требуется добавить образцы крови.

Так для обнаружения кори проводится исследование с коревым маркером, для сальмонеллёза – сальмонеллёзным.

Методом РПГА пользуются для обнаружения дифтерии, шигеллеза и других заболеваний кишечника. Чувствительность этой реакции выше, чем у бактериального посева и дает возможность диагностировать нарушения в эндокринной системе, дизентерию и воспалительные процессы в толстой кишке.

Анализ не позволяет контролировать лечение сифилиса. Дело в том, что если человеческий организм был заражен бактерией бледной трепонемы единожды, то тест на РГПА будет выдавать положительные результаты всю его жизнь.

Изредка встречается ситуация, что результаты теста положительные, но бактерий сифилиса в организме нет, и никогда не было. Это называется ложноположительным результатом, и о возможных причинах этого явления будет сказано ниже.

Но данный факт стоит учитывать, и прежде, чем будет поставлен диагноз, нужно оценить другие лабораторные данные.

Подготовка и проведение

При проведении РПГА теста используется венозная кровь.

Обычно, анализ проводится утром, и это весьма удобно для сдающего кровь, так как для получения корректных результатов требуется отказаться от пищи за шесть часов до процедуры.

От курения, желательно тоже отказаться. Врачи также рекомендуют несколько дней воздерживаться от употребления алкоголя и постараться избежать стрессов.

Если вы принимаете лекарства длительное время, стоит предупредить об этом врача, назначающего вам анализ.

Это исследование позволяет выяснить — есть ли в организме клетки, синтезированные для борьбы с агрессивными бактериями.

Для того, чтобы это сделать, к реагенту РПГА добавляют сыворотку крови и оценивают степень и вид того, как склеиваются эритроциты. В зависимости от количества в сыворотке крови антител к трепонеме, изменяется степень склеивания эритроцитов.

Наблюдая за реакцией, можно сделать выводы не только о наличии или отсутствии антител, но и выяснить их количество.

Сам анализ проводится достаточно просто. Реагенты для теста помещают в выемки специальных пластинок, а о результате судят по цвету и форме осадка.

У зараженного человека, цвет агглютината эритроцитов будет темно-красным, а форма будет напоминать зонтик, если эритроциты группируются в четкую «пуговицу», то результат отрицательный.

Слабоположительная реакция выглядит, как кольцо.

Результат анализа представляют в виде титра антител. Положительный титр означает возможное инфицирование Treponema pallidum, хотя встречается и ложноположительная реакция.

Отрицательный результат, к сожалению, тоже не всегда правдив. В самом начале заболевания, когда антитела еще синтезировались, анализ может дать ложноотрицательный результат.

Расшифровка результатов

После сдачи крови, требующуюся для проверки, проходит некоторое время и результаты анализа становятся известны. Расшифровка исследования может быть выполнена только специалистом. Правильно интерпретировать полученные данные, человек не имеющий медицинского образования, не сможет.

Положительный

Результат исследования обозначается уровнем титра. Титр — это максимально возможное разведение пробы крови, до той степени, при которой еще обнаруживаются антитела (т. е. титр обозначает количество антител в крови).

Положительный результат, полученный методом РПГА теста, говорит о присутствии в организме бактерий, вызывающих болезнь. По статистическим данным, ложноположительные реакции встречаются не чаще, чем в 2,5%, от общего количества прошедших это обследование.

У людей, которые не заражены сифилисом, подобный результат, исследования могут выдавать за счёт таких факторов:

  • инфекционных заболеваний (грипп, ветрянка, ОРВИ и т.п.);
  • недавно перенесенного инфаркта миокарда;
  • беременности;
  • обширных травм;
  • онкологических заболеваний;
  • ВИЧ-инфекции;
  • в период менструации у женщин;
  • наличия в крови наркотических препаратов;
  • гепатита В и С;
  • период после вакцинации;
  • хронических заболеваний.

Обычно, если реакция ложноположительная, то титр будет низким. Для вторичного сифилиса и проявления ранее скрытого сифилиса, характерны высокие показатели.

Также, у пациентов с онкологией, в крови обычно содержится большое количество антител, а потому при проведении РГПА проверки, в результатах будет отображен высокий титр, что является ложнополжительной реакцией для теста на определение сифилиса.

Если реакция РГПА положительная, то требуется как можно быстрее обратиться к врачу. Квалифицированный медработник обязательно назначит дополнительные анализы и проведет полное обследование. Лечение сифилиса требует применения антибиотиков широкого спектра. На более тяжелых стадиях заболевания к терапии добавляют внутримышечные антибактериальные инъекции.

В лечении нуждается не только сам пациент, но и все его близкие, а также контактирующие с ним люди. Для успешного излечения нужно провести дезинфекцию в доме заболевшего.

Отрицательный

Отрицательный результат – тоже результат! В случае с анализами на сифилис реакция на такой результат часто положительная. Но не стоит забывать, что такой ответ на пробу РПГА можно получить вследствие разных причин.

  • Первая и самая удачная для проходящего тест человека – реакция отрицательная, потому что человек не болен сифилисом.
  • Вторым вариантом получения такого результата может быть нарушение технологии сбора крови и другие ошибки медицинского персонала.
  • И третья, наиболее неприятная для пациента ситуация, когда человек на самом деле, уже заражен сифилисом, но организм еще не среагировал, и выработка антител пока не началась. В таком случае анализ дает ложноотрицательную реакцию.

Из этого следует, что если вы подозреваете у себя сифилис и получили отрицательные результаты обследования, то стоит повторить тест через некоторое время или обратиться к другим методам диагностики.

Точность результата

Считается, что методика исследования РПГА дает практически стопроцентно точные результаты. В целом, это верная информация, но есть нюансы.

Когда мы говорим о заражении сифилисом, стоит помнить, что с момента, когда в организм попадают спирохеты бледной трепонемы, до момента, когда организм начинает вырабатывать антитела проходит от двух недель до месяца.

Анализ РГПА нацелен обнаружение вырабатывающихся организмом антител, а саму бактерию-возбудитель он не определяет.

Из этой информации можно сделать вывод, что хотя на второй и третьей стадии заражения сифилисом, точность анализа и составляет 99%, точность результата на первой стадии немного другая. Первые две недели после заражения, вероятность определения заболевания составляет 86%.

Чувствительность РПГА, как «трепонемного» метода, все же выше «нетрепонемных», а потому это обследование применяется, в том числе и для уточнения или подтверждения неспецифичных тестов. Но если в первую очередь проводилось именно РПГА-тестирование то его результаты, также требуется подтвердить другим специфическим тестом.

В случае диагностики других заболеваний, точность также весьма высокая. Например, РПГА тест с дизентерийным маркером, гораздо точнее анализа бактериального посева и позволяет как выявить возбудителя, так и определить острую или хроническую фазу диареи у пациента.

Альтернативы

Так как мы уже выяснили, что ни одна методика, в том числе РПГА, не дает стопроцентной уверенности в результате, не вызывает удивления, что медики назначают обширные обследования. В таких комплексных исследованиях удачно комбинируются как специфические и так неспецифические методы тестирования, что позволяет, практически полностью, исключить вероятность ошибочной диагностики.

Итак, в комплексе с РПГА или вместо неё используют такие неспецифические тесты, как реакцию Вассермана и микрореакцию преципитации. И первый, и второй метод, требуют использования крови из пальца и не используется на начальных этапах течения болезни.

Из специфических тестов, которыми можно заменить РПГА, стоит отметить:

  • ИФА или иммуноферментный анализ. Это один из наиболее точных методов диагностики, который обычно назначают, после прохождения неспецифических исследований.
  • РИФ или МФА. Метод флуоресцирующих антител. Подходит для диагностики на ранних стадиях.
  • TPI — Treponema pallidum immobilization test. Точный метод, но используется, только после четвертого месяца болезни.
  • ИБ. Иммуноблоттинг или вестернблоттинг. Новый метод. Очень точный и очень дорогой.
  • Лабораторный анализ. Быстрый и недорогой.

Суммируя все написанное, можно сделать вывод, что проверка крови на РПГА, это современный и достаточно точный метод для проверки здоровья. Благодаря тому, что РПГА относительно несложный и недорогой анализ, он используется повсеместно.

Источник: https://doctor-krov.com/analizy/rpga.html

Рпга в диагностике сифилиса: подробно о методе исследования

Методика реакции РПГА (по Бойдену)
РПГА на сифилис является одним из точных методов определения заболевания

В статье вы сможете найти информацию о реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), применяющуюся в исследовании на сифилис. Подробно рассмотрим, как проводится данная реакция, что для нее необходимо и когда ее нужно применять.

Существует много методов проверки на сифилис. РПГА в диагностике сифилиса является довольно распространенным исследованием, так как является информативной и не сложной. Чтобы подробнее поговорить о РПГА, необходимо понять, что собой являет сифилис, как протекает и чем грозит.

Справка о сифилисе

Сифилис – хроническое инфекционное ЗППП, вызываемое бледной трепонемой. Бледная трепонема – микроорганизм из порядка спирохет, которые представляют собой бактерии в виде спиралей.

Бледная трепонема в отличие от других спирохет имеет от 8 до 15 завитков, двигается плавно и медленно

Есть несколько путей заражения сифилисом:

  1. Прямой (половой), преобладающий.
  2. Косвенный (бытовой).
  3. Трансплацентарный (от женщины к плоду).

Бледная трепонема способна поражать практически все ткани организма

Сифилис принято разделять на несколько этапов:

  1. Инкубационный период.
  2. Первичный сифилис.
  3. Вторичный сифилис.
  4. Третичный сифилис.

Инкубационный период длится около двух недель, при этом нет никаких видимых признаков заражения. Бледная трепонема в этот момент активно осваивается в организме, размножается. Вследствие этого на коже/слизистой, в том месте, через которое попали микроорганизмы, формируется первичный очаг.

Первичный очаг представляет собой узелок, твердый и безболезненный, характерно его покраснение. Такое образование, иначе именуемое твердым шанкром, указывает на начало первичного сифилиса. По прошествии некоторого времени (до 2-3 недель) поражаются ближайшие лимфоузлы.

На фото в центре изъязвленного твердого шанкра красное дно: под ним множество мелких сосудов

Внимание! В инкубационном периоде и в начале (2-3 недели) первичного сифилиса бледная трепонема в крови не обнаруживается, так как она еще не успела попасть в системный кровоток. Анализ крови на данном этапе неинформативен.

Во время вторичного сифилиса на коже больного обнаруживаются множественные высыпания. Они могут быть разных форма и размеров, называются сифилидами. В каждом таком сифилиде содержится огромное количество трепонем, потому период считается самым заразным.

В настоящее время редко встречается последняя стадия, так как она развивается лишь через годы от момента заражения. Кроме того, заболевание вполне успешно поддается лечению, если проходить терапию на первых этапах.

Во время третичного сифилиса поражаются внутренние органы и системы, это может приводить к летальному исходу. Для этого периода характерны гуммы – особые отграниченные зоны воспаления, которые имеют хронический характер. Эта стадия практически не несет опасности для окружающих.

В центре гуммы располагаются трепонемы и зона мертвых клеток (некроза), иммунная система не справляется с их уничтожением. Иммунные клетки вокруг центра видоизменяются, укрупняются

Проанализировав все вышесказанное, можно выделить несколько критериев, которые влияют на выраженность и локализацию поражения:

  • путь проникновения трепонемы в организм;
  • стадия заболевания;
  • время начала лечения и сам подход к терапии.

Какие существуют методы для выявления сифилиса?

Есть много анализов, которые позволяют выявить бледную трепонему или следы ее присутствия. Разные тесты могут использоваться на разных этапах. Существуют также менее информативные, т.н. скрининговые тесты и более подробные – специфические.

Можно рассматривать другую классификацию тестов:

Прямые тесты обнаруживают микроорганизм или его ДНК, а непрямые лишь косвенные признаки наличия паразита в крови.

РПГА

РПГА относят к специфическим непрямым тестам. РПГА – серологическая реакция, т.е. основання на взаимодействии антитела с подходящим к нему антигеном. Этот метод считается одним из самых чувствительных.

Серологические реакции проводятся специалистами, однако существуют аналогичные тесты для домашнего проведения анализов. К ним прилагается инструкция, которую необходимо тщательно соблюдать, чтобы не нарушать результатов.

При наличии положительного анализа не следует предаваться панике: тест может выдавать ложноположительный результат.

В случае, когда антитело строго соответствует антигену (по принципу ключ-замок), происходит их соединение

РПГА служит для выявление антител сыворотки крови, которые образовались в ответ на проникновение бледной трепонемы в кровь. Определение антител проводят с помощью эритроцитарного диагностикума.

Эритроцитарный диагностикум представляет сбой эритроциты с адсорбированными на них антигенами к соответствующим антителам.

Если антитела сыворотки крови соединятся с антигенами, то произойдет и опосредованное склеивание эритроцитов, а в пробирке/лунке будет образовываться хлопьевидный осадок.  Если же осадок не образуется, значит, реакция отрицательная и человек не болен сифилисом.

Результаты анализа в лунках буду выглядеть следующим образом при различных результатахАнтитело (иммуноглобулин) прикрепляется комплементарно к антигену

Виды РПГА

Есть два способа постановки РПГА:

  1. Качественный
  2. Полуколичественный

Качественная реакция – собственно описанная реакция пассивной гемагглютинации. При положительном результате (выпадение осадка) врач назначает уточняющее полуколичественное исследование тем же методом, но может провести и другой анализ: иммуноферментный (ИФА), полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Анализ на сифилис РПГА полуколичественный подразумевает исследование нарастания/снижения титра антител с течением времени. Обычно отслеживают изменения с периодичностью раз в неделю в течение четырех недель.

Если титр нарастает с течением времени хотя бы в 4 раза, то диагноз подтверждается. Следует отметить, что у пациентов, прошедших лечение по поводу сифилиса, высокие титры антител могут сохраняться годами и десятилетиями. Цена РПГА составляет в среднем около 500 рублей, но варьирует в разных клиниках, лабораториях и городах.

в этой статье продемонстрирует, как проводят анализ на сифилис РПГА полуколичественно.

Источник: https://ZPPP.su/diagnostika/rpga-v-diagnostike-sifilisa-76

Реакция прямой гемолитической агглютинации (РПГА)

Методика реакции РПГА (по Бойдену)

Реакция прямой гемолитической агглютинации (РПГА) – распространённый метод исследования, используемый в лабораторной клинической диагностике.

Метод агглютинации очень прост в своем исполнении, но при этом достаточно эффективен.

В основном используется при эпидемических вспышках и в скрининговых исследованиях людей на различные инфекционные и бактериальные заболевания, такие как сифилис, дифтерия, менингококк, сальмонеллёз и т.д.

Еще один из плюсов этого анализа состоит в том, что можно не только определить наличие у человека заболевания, но и на какой стадии оно находится. Это очень помогает в выборе тактики лечения.

Суть метода

Человеческий организм обладает иммунной системой, именно она, столкнувшись с атакой вирусов или бактерий, защищает его. В итоге образуются специфические белки или антитела, именно их и определяют в крови человека.

Принцип метода РПГА основан на связывании антител, находящихся в организме, с антигенами микроорганизмов или риккетсий, которых ищут при подозреваемом заболевании. Если слипания между антителами и антигенами не происходит, значит, организм никогда не сталкивался с возбудителем.

В основном в реакции используются эритроциты, на оболочке которых уже наслоены антигены возбудителя. При взаимодействии с имеющимися антителами происходит склеивание и образуется видимый осадок.

Постановка реакции

Проводится реакции прямой гемолитической агглютинации на микропланшетах в специальных микролунках. Перед анализом готовится ряд десятикратных разведений исследуемой сыворотки.

В самом начале или конце планшета ставятся контроли. В положительный контроль добавляют сыворотку крови уже с антителами возбудителя. Отрицательный контроль состоит из физиологического раствора.

Далее, в остальные лунки последовательно раскапываются разведенные эритроциты, с уже имеющимися антигенами. Планшет аккуратно перемешивается методом встряхивания и помещается в термостат для инкубации.

После чего происходит контроль результатов.

Учет результатов

При учете результатов можно не только сказать, есть заболевание или нет, но еще и определить количество возбудителя. Соответственно, чем больше накоплено в организме антител, тем и результат будет больше. Считается численный результат в титре.

Например, при определении сифилиса у человека к сыворотке крови добавляют антигены трепонемы. Если у человека циркулирует заболевание, то в его крови накоплено уже достаточно антител. Поэтому антигены риккетсии и специфические антитела слипаются, образуя осадок – медицинским языком это называется агглютинацией.

Если учитывать результат в качественной реакции, то он отсчитывается по крестам «+». Определяется по выпавшему осадку в лунке. Положительным результатом считается осадок в виде равномерно распределенных агглютинированных эритроцитов. Напоминает раскрывшийся «зонтик».

Отрицательный результат представлен в виде маленького кольца, который сконцентрирован на дне лунке. Он же напоминает «пуговку». Если реакция отчитывается как слабоположительная, то в лунке возникает что-то в виде плотного кольца, но при этом по краям образуются эритроциты.

Как сказано выше, учет ведется по четырем крестам:

  • «+» – слабоположительная реакция, достаточно трудно по такому результату установить наличие, а тем более титр возбудителя. Обычно пациенту назначается пересдача через две недели.

    Если возбудитель присутствует, то за это время антитела в организме повысятся в несколько тысяч раз. Но результат может быть и ложноположительным. Причиной такой интерпретации является перекрёстная реакция.

    Она может появиться при наличии у человека:

    • инфекционных заболеваний (ВИЧ, гепатиты);
    • аутоиммунных заболеваний;
    • новообразований;
    • беременности;
    • наркотических средств в крови.
  • «++» – также считается слабоположительной, но титр визуализируется больше.

    Это говорит о только начинающемся положительном процессе. При этом результат выглядит как кольцо, достаточно широкое с просветом в центре.

  • «+++» – положительная реакция, агглютинированные эритроциты довольно равномерно располагаются по всей лунке, а по периферии образуют тонкое кольцо, напоминая «зонтик».

    Это говорит о протекании достаточно бурной инфекции в организме.

  • «++++» – резко положительная реакция, эритроциты полностью распределяются в толще микролунки, иногда образуют тонкое кольцо по периферии. Оно образуется из-за высокой концентрации в организме антител.

Реакция проводится в сопровождении отрицательного и положительного контроля. В лунках с отрицательным должно быть плотное кольцо на дне, а при положительном – равномерное распределение эритроцитов по всему пространству лунки.

Показания

Анализ назначается пациентам при подозрении на наличие у них различных заболеваний.

Проводится реакция в следующих случаях при:

  • подозрении на сифилис, который проявляется в виде шанкра на слизистых оболочках половых органов, специфических кожных проявлений, алопеции;
  • при контакте с инфицированными партнёрами;
  • беременности;
  • наркотическом или алкогольном опьянении;
  • онкологических заболеваниях;
  • энцефалите и боррелиозе;
  • контроле уже переболевших людей.

Если есть подозрения или для большей достоверности, анализы для людей из «группы риска» рекомендуется пересдать через 4 недели, а затем держать на контроле и сдать кровь через три месяца.

Подготовка к анализу

Во избежание перекрестных реакций и неправильной трактовки результатов, пациент должен подготовится к анализу заранее. Кровь на этот вид анализа берется из вены.

Для этого нужно соблюсти несколько правил:

  • анализ нужно сдавать натощак, накануне ограничившись легким, нежирным ужином;
  • если есть необходимость, то можно пить воду без газов, но в малом количестве;
  • за час до сдачи отказаться от курения, это минимальное время, лучше его увеличить;
  • за день до анализа не употреблять алкогольные напитки и токсические препараты;
  • отказаться от приема лекарственных средств, хотя бы в сам день сдачи. При невозможности, обязательно поставить врача, направившего на анализ, в известность.

Реакция прямой гемагглютинации является достоверным методом при исследовании различных инфекций в организме человека. Она широко применяется в диагностике.

Cергеева Екатерина Андреевна

Источник: http://comp-doctor.ru/zoj/rpga.php

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.